Naudojama viena cheminės medžiagos tyrimo koncentracija ([13]). Augalų apsaugai skirtoms cheminėms medžiagoms, kurios tiesiogiai pilamos į vandens telkinius, didžiausia etiketėje nurodyta dozavimo koncentracija turi būti laikoma didžiausia taikoma norma, apskaičiuojama pagal tyrimo indo vandens paviršiaus plotą. Visais kitais atvejais naudojama koncentracija turi būti pagrįsta aplinkoje pasklindančio kiekio vertėmis. Būtina užtikrinti, kad būtų naudojama tinkama tiriamosios medžiagos koncentracija, siekiant apibūdinti transformavimo kelią ir transformavimo produktų susidarymą ir išnykimą. Tais atvejais, jei tiriamosios medžiagos koncentracijos vertės tyrimo pradžioje yra arti aptikimo ribos ir/arba jei pagrindiniai transformavimo produktai negali būti lengvai rasti, kai jie sudaro 10 % tiriamosios medžiagos įdėjimo normos, gali tekti naudoti didesnes dozes (pvz., 10 kartų). Tačiau, jei naudojamos didesnės tyrimo koncentracijos, medžiaga neturi daryti reikšmingo neigiamo poveikio vandens ir nuosėdų sistemos mikroorganizmų aktyvumui. Siekiant gauti pastovią tiriamosios medžiagos koncentraciją skirtingų matmenų induose, gali būti naudinga reguliuoti įdedamos medžiagos kiekį pagal vandens sluoksnio gylį inde ir jo gylį lauko sąlygomis (laikant, kad jis yra lygus 100 cm, bet galima naudoti ir kitas gylio vertes). Apskaičiavimo pavyzdys pateiktas 4 priede.
\nGeriausia tiriamąją medžiagą pilti į tyrimo sistemos vandeninę fazę kaip vandeninį tirpalą. Jei kitaip neįmanoma, tiriamajai medžiagai įpilti ir paskirstyti leidžiama naudoti nedidelius kiekius su vandeniu maišių tirpiklių (pvz., acetono, etanolio), tačiau jie neturi sudaryti daugiau kaip 1 % V/V ir neturi neigiamai veikti tyrimo sistemos mikroorganizmų aktyvumo. Reikia kruopščiai ruošti tiriamosios medžiagos vandeninius tirpalus, vienalytiškumui užtikrinti gali būti naudinga naudoti generavimo kolonėles ir išankstinį maišymą. Vandeninį tirpalą įpylus į tyrimo sistemą, rekomenduojama nestipriai maišyti vandeninę fazę, stengiantis kiek įmanoma mažiau liesti nuosėdas.
\nPaprastai nerekomenduojama naudoti preparatų, nes jų ingredientai gali veikti tiriamosios medžiagos ir/arba transformavimo produktų pasiskirstymą tarp vandens ir nuosėdų fazių. Tačiau, jei tiriamoji medžiaga yra mažai tirpi vandenyje, preparatas gali būti tinkamas pasirinkimas.
\nInkubavimo indų skaičius priklauso nuo mėginių ėmimo kartų skaičiaus (žr. 28.3 punktą). Turi būti naudojamas pakankamas tyrimo sistemų skaičius, kad kiekvieną kartą imant mėginį būtų galima paaukoti dvi sistemas. Jei naudojami kiekvienos vandens ir nuosėdų sistemos kontroliniai mėginiai, jie neturi būti apdorojami tiriamąja medžiaga. Kontroliniai mėginiai gali būti naudojami nuosėdų mikrobinei biomasei ir vandens bei nuosėdų bendros organinės anglies kiekiui nustatyti tyrimo pabaigoje. Du iš kontrolinių mėginių (t. y. po vieną kontrolinį mėginį kiekvienoms vandeninėms nuosėdoms) gali būti naudojami reikiamiems nuosėdų ir vandens parametrams kontroliuoti aklimatizacijos laikotarpiu (žr. 25.2 punkto lentelę). Du papildomi kontroliniai mėginiai turi būti įtraukti tuo atveju, kai tiriamoji medžiaga pridedama naudojant tirpiklį, kad būtų galima matuoti jo neigiamą poveikį tyrimo sistemos mikroorganizmų aktyvumui.
\n28.3. Tyrimo trukmė ir mėginių ėmimas Tyrimas paprastai neturi būti ilgesnis kaip 100 parų (6), ir turi vykti tol, kol nustatomas skilimo kelias ir pasiskirstymo tarp vandens ir nuosėdų charakteristika arba 90 % tiriamosios medžiagos išsisklaido transformavimo keliu ir/arba išgaruoja. Mėginiai turi būti imami ne mažiau kaip šešis kartus (įskaitant nulinį laiką), naudojant neprivalomą pradinį tyrimą (žr. 28.4 punktą) tinkamam mėginių ėmimo režimui ir tyrimo trukmei nustatyti, išskyrus, kai apie tiriamąją medžiagą yra pakankamas kiekis duomenų iš ankstesnių tyrimų. Jei tiriamos hidrofobinės medžiagos, pradiniu tyrimo laikotarpiu gali būti reikalingi papildomi mėginių ėmimo taškai pasiskirstymo tarp vandens ir nuosėdų fazių greičiui nustatyti.
\nAtitinkamu mėginio ėmimo laiku inkubavimo indai su visu turiniu (kartotiniai mėginiai) imami analizei atlikti. Nuosėdos ir virš jų esantis vanduo analizuojami atskirai([14]). Paviršinis vanduo atsargiai nupilamas, kiek įmanoma mažiau liečiant nuosėdas. Tiriamosios medžiagos ir transformavimo produktų ekstrahavimas ir apibūdinimas turi būti atliekamas taikant atitinkamas analizės metodikas. Reikia imtis priemonių pašalinti medžiagą, kuri galėjo adsorbuotis ant inkubavimo indo arba jungiamuosiuose vamzdeliuose, kurie naudojami lakioms medžiagoms surinkti.
\n28.4. Neprivalomas pradinis tyrimas Jei trukmė ir mėginių ėmimo režimas negali būti įvertinti pagal ankstesnius atitinkamus tiriamosios medžiagos tyrimus, tikslinga atlikti pradinį tyrimą, kuris turi būti atliekamas tomis pačiomis sąlygomis, kurios yra numatytos galutiniam tyrimui atlikti. Ataskaitoje turi būti trumpai nurodytos išankstinio tyrimo, jei atliekamas, sąlygos ir rezultatai.
\n28.5. Matavimai ir analizė Kiekvienu mėginio ėmimo laiku matuojama ir pateikiama ataskaitoje tiriamosios medžiagos ir transformavimo produktų koncentracija vandenyje ir nuosėdose (kaip koncentracijos ir įdėto kiekio procentinė dalis). Paprastai galioja taisyklė, kad transformavimo produktai, kurių randama ≥ 10 % nuo bendro vandens ir nuosėdų sistemos pradinio radioaktyvumo, turi būti identifikuoti, išskyrus, kai galima pagrįsti, kad tai neįmanoma. Be to, turi būti identifikuoti transformavimo produktai, kurių koncentracija visą tyrimo laiką didėja, netgi jei jų koncentracija nėra didesnė už pirmiau pateiktas ribines vertes, kadangi toks reiškinys gali rodyti jų išsilaikymą. Tai turi būti nagrinėjama kiekvienu konkrečiu atveju, ataskaitoje pateikiant pagrįstus paaiškinimus.
\nAtaskaitoje turi būti pateikti rezultatai, kiekvienu mėginio ėmimo metu gauti dujų ir lakiųjų medžiagų surinkimo sistemose (CO2 ir kiti produktai, t. y. lakūs organiniai junginiai). Turi būti pateiktos mineralizacijos greičio vertės. Kiekvienam mėginio ėmimo laikui pateikiamas neekstrahuojamų (surištųjų) likučių kiekis.
\nTuri būti apskaičiuota tiriamosios medžiagos pusėjimo trukmė, DT50 ir, jei tinka, DT75 ir DT90, kartu nurodant pasikliovimo rėžius (žr. 23 punktą). Informaciją apie tiriamosios medžiagos pasklidimo vandenyje ir nuosėdose greitį galima gauti taikant atitinkamus įvertinimo būdus. Tai gali būti pseudopirmojo laipsnio kinetikos taikymas, empirinės geriausio kreivių atitikimo metodikos, kuriose taikomi grafinis arba skaitmeninis sprendimai, ir sudėtingesni įvertinimo būdai pagal, pvz., vieno arba kelių skyrių modelius. Daugiau detalių galima rasti atitinkamuose paskelbtuose literatūros šaltiniuose (35)(36)(37).
\nVisi būdai turi savo privalumus ir silpnąsias vietas ir labai skiriasi sudėtingumu. Prielaida apie pirmojo laipsnio kinetiką gali būti per didelis skilimo ir pasiskirstymo procesų supaprastinimas, tačiau, esant galimybei, gaunamas dydis (greičio konstanta arba pusėjimo trukmė), kurį lengva suprasti ir kuris yra labai naudingas, kuriant imitacinį modelį ir apskaičiuojant numatomas aplinkos koncentracijos vertes. Taikant empirinius metodus arba tiesines transformacijas, galima gauti geresnį kreivių ir duomenų atitikimą, taigi geriau įvertinti pusėjimo trukmę, DT50 ir, jei tinka, DT75 ir DT90 vertes. Tačiau gautųjų konstantų taikymas yra ribotas. Taikant modelius su skyriais, galima gauti kelias rizikos įvertinimui naudingas konstantas, kurios aprašo skilimo skirtinguose skyriuose greitį ir cheminės medžiagos pasiskirstymą. Be to, tokie modeliai turėtų būti naudojami pagrindinių transformavimo produktų susidarymo ir skilimo greičio konstantoms įvertinti. Visais atvejais pasirinktas metodas turi būti pagrįstas ir tyrėjas turi grafiškai ir/arba statistiškai parodyti gerą atitikimo kokybę.
\nX. BAIGIAMOSIOS NUOSTATOS 30. Tyrimų ataskaita Tyrimų ataskaitoje turi būti ši informacija:
\n30.1. Tiriamoji medžiaga:
\n30.2. Etaloninės medžiagos:
\n30.3. Tyrimo nuosėdos ir vanduo:
\n30.4. Tyrimo sąlygos:
\n30.5. Rezultatai:
\nAnaerobinė tyrimo sistema Tyrimo, naudojant anaerobinę tyrimo sistemą, procedūra iš esmės atitinka metodiką, aprašytą aerobinei sistemai, išskyrus tai, kad kiekviename inkubavimo įrenginyje virš vandens paviršiaus leidžiamas drėgnas azotas pakankamam azoto kiekiui erdvėje virš skysčio užtikrinti. Nuosėdos ir vanduo laikomi anaerobiniais, kai oksidacijos-redukcijos potencialas (Eh) yra mažesnis kaip minus 100 mV.
\nAtliekant anaerobinį tyrimą, mineralizacija įvertinima pagal išsiskyrusio anglies dioksido bei metano kiekio matavimus. ______________ LAND 77-2005 „Aerobinis ir anaerobinis transformavimas vandens telkinių dugno nuosėdų sistemose (C.24)“ 2 priedas DUJŲ PRATEKĖJIMO METODĄ TAIKANČIOS APARATŪROS PAVYZDYS Apsauginė gaudyklė, tuščia 1 gaudyklė: etilenglikolis lakiems organiniams produktams sugerti 2 gaudyklė:
\n0,1 mol/l sieros rūgštis šarminiams lakiems produktams sugerti 3 ir 4 gaudyklės:
\n2 mol/l natrio hidroksidas CO2 ir kitiems rūgštiniams lakiems produktams sugerti ______________ LAND 77-2005 „Aerobinis ir anaerobinis transformavimas vandens telkinių dugno nuosėdų sistemose (C.24)“ 3 priedas BIOMETRINĖS APARATŪROS PAVYZDYS Magnetinė maišyklė CO2 ir lakiųjų organinių junginių sugėrimo sistema (pralaidi deguoniui) CO2 ekstrahavimo įtaisas Anga deguoniui vandenyje analizuoti Anga dujoms analizuoti (uždaryta membrana) Maišytuvas Vanduo Nuosėdos ______________ LAND 77-2005 „Aerobinis ir anaerobinis transformavimas vandens telkinių dugno nuosėdų sistemose (C.24)“ 4 priedas Į TYRIMO INDUS DEDAMOS DOZĖS APSKAIČIAVIMO PAVYZDYS Cilindro vidinis skersmuo: = 8 cm Vandens stulpelio gylis, išskyrus nuosėdas: = 12 cm Paviršiaus plotas: 3,142 × 42 = 50,3 cm2 Įterpimo norma: 500 g tiriamosios medžiagos/ha atitinka 5 µg/cm2 Bendras kiekis, µg: 5 × 50,3 = 251,5 µg Nustatykite kiekį pagal 100 cm stulpelio gylį: 12 × 251,5 : 100 = 30,18 µg Vandens stulpelio tūris: 50,3 × 12 = 603 ml Koncentracija vandenyje: 30,18 : 603 = 0,050 µg/ml arba 50 µg/l ______________ LAND 77-2005. „Aerobinis ir anaerobinis transformavimas vandens telkinių dugno nuosėdų sistemose (C.24)“ 5 priedas BIBLIOGRAFIJA
\nCsoil – pradinė koncentracija dirvožemyje [mg × kg-1] A – įterpimo norma [kg × ha-1]; l – lauko dirvožemio sluoksnio storis [m]; d – sauso dirvožemio bertinis tankis [kg × m3].
\nPaprastai, esant 1 kg × ha-1 įterpimo normai, koncentracija 10 cm dirvožemio sluoksnyje maždaug lygi 1 mg × kg-1 (darant prielaidą, kad bertinis tankis yra lygus 1 g × cm-3). ([8]) Mückenhausen, E. (1975). Die Bodenkunde und ihre geologischen, geomorphologischen, mineralogischen und petrologischen Grundlagen. DLG-Verlag, Frankfurt, Main. ([9]) Pvz., jei tiriamoji medžiaga turi vieną žiedą, žymėtasis atomas turi būti šiame žiede; jei tiriamoji medžiaga turi du žiedus arba daugiau, gali tekti atlikti atskirus tyrimus kiekvieno žymėto žiedo likimui įvertinti ir atitinkamai informacijai apie transformavimo produktų sudarymą gauti. ([10]) Kadangi šie šarminiai sugėrimo tirpalai sugeria anglies dioksidą, esantį ventiliuojamame ore ir susidariusį dėl kvėpavimo, atliekant aerobinius tyrimus, jie reguliariai turi būti keičiami, kad būtų išvengta soties, taigi absorbcijos gebos praradimo. ([11]) [Molis + dumblas] yra mineralinė dalis nuosėdų, kurių dalelių dydis < 50 μm. ([12]) Naujausi tyrimai parodė, kad, jei laikoma esant 4° C, gali sumažėti nuosėdų organinės anglies kiekis, dėl ko gali sumažėti mikroorganizmų aktyvumas. ([13]) Toms cheminėms medžiagoms, kurios į paviršinius vandenis patenka skirtingais būdais, kai dėl to gaunamos labai skirtingos koncentracijos vertės, gali būti naudingas tyrimas naudojant antrą koncentraciją, jei mažesniąją koncentraciją galima nustatyti pakankamai tiksliai. ([14]) Tais atvejais, kai gali vykti greitas anaerobinio transformavimo produktų pakartotinis oksidavimas, imant mėginius ir analizuojant turi būti užtikrinamos anaerobinės sąlygos.