LIETUVOS RESPUBLIKOS ŽEMĖS ŪKIO MINISTRAS Į S A K Y M A S DĖL GRŪDŲ UŽKRĖSTUMO KŪLIŲ SPOROMIS NUSTATYMO METODIKOS PATVIR

LIETUVOS RESPUBLIKOS ŽEMĖS ŪKIO MINISTRAS Į S A K Y M A S DĖL GRŪDŲ UŽKRĖSTUMO KŪLIŲ SPOROMIS NUSTATYMO METODIKOS PATVIRTINIMO 2001 m. gruodžio 28 d. Nr. 466 Vilnius Siekdamas įgyvendinti Europos Sąjungoje taikomus grūdų kokybės nustatymo metodus:

1. Tvirtinu Grūdų užkrėstumo kūlių sporomis nustatymo metodiką (pridedama).
2. Nustatau, kad metodika įsigalioja nuo 2002 m. vasario 1 d. ŽEMĖS ŪKIO MINISTRAS JERONIMAS KRAUJELIS ______________ PATVIRTINTA Lietuvos Respublikos žemės ūkio ministro 2001 m. gruodžio 28 d. įsakymu Nr. 466 GRŪDŲ UŽKRĖSTUMO KŪLIŲ SPOROMIS NUSTATYMO METODIKA
3. Tikslas ir taikymo sritis Šioje metodikoje aprašyti grūdų užkrėstumo kūlių sporomis nustatymo metodai. Grūdų užkrėstumo kūlių sporomis nustatymas mikroskopiniu metodu atitinka Amerikos grūdų chemijos asociacijos (AACC) metodą 42-70 ir jį rekomenduojama taikyti kaip pamatinį metodą. Šis metodas taikomas ir Europos Sąjungos šalyse. Abu metodai taikomi visų rūšių varpinių javų grūdams.
4. Metodų esmė 2.
5. Nustatant kūlių sporas svorio analizės metodu, jos atskiriamos nuo grūdų plaunant ir po to nusodinamos ant popierinio filtro vakuuminio filtravimo būdu. 2.
6. Mikroskopiniu metodu nustatomas kūlių sporų kiekis 250 g grūdų. PASTABA. Kūlėtais laikomi kviečiai ar rugiai, turintys būdingą kūlių kvapą, arba kai 250 g grūdų yra daugiau kaip 13 vidutinio dydžio kūlių maišelių (0,05 % masinės dalies). Kai kūlių maišeliai nesuskilę, kūlių nustatymas nėra sudėtingas. Tuo atveju, kai kūlių maišeliai suskilę ir sporos pasklidę po visus grūdus, mikroskopiniu metodu galima nustatyti, ar kūlių sporų kiekis viršija jų kiekį, esantį 13-oje kūlių maišelių. Įvertinant grūdų užkrėstumą kūlių sporomis, priimama, kad vienas vidutinio dydžio kūlių maišelis sveria 0,01 g ir jame yra maždaug 3 750 000 sporų, o tai atitinka 48 750 000 sporų 250 g grūdų.
7. Nuorodos Metodika parengta vadovaujantis šiais standartais: LST 1422:1997 Grūdai ir grūdų produktai, jų gamybos technologija, kokybės kontrolė. Terminai ir apibrėžimai. LST ISO 13690:2000 Grūdai, ankštiniai ir jų malti produktai. Ėminių ėmimas iš talpyklų. LST EN ISO 3696:1996 Analizės vanduo. Apibūdinimas ir bandymo metodai.
8. Reagentai 4.
9. Acto rūgšties etilo esteris. 4.
10. Analizės vanduo, mažiausiai 3-iojo kokybės lygio pagal LST EN ISO
12. Įranga 5.
13. Kūlių sporų kiekiui nustatyti svorio analizės metodu: 5.1.
14. Laboratorinės svarstyklės, kurių svėrimo paklaida ± 0,1 g. 5.1.
15. Analizinės svarstyklės, kurių svėrimo paklaida ± 0,001 g. 5.1.
16. 250 ml Erlenmejerio ar kita kūgio pavidalo kolba. 5.1.
17. 100 ml, 250 ml matavimo cilindrai. 5.1.
18. Sietinis audinys, kurio akutės ne didesnės kaip 0,1 mm. 5.1.
19. Metalinis sietelis, kurio akučių dydis 2, 3 ar 4 mm. 5.1.
20. Vakuuminis siurblys arba čiurkšlinis vakuuminis siurblys. 5.1.
21. Tankūs bepeleniai popieriniai filtrai (su „mėlyna juosta“). 5.1.
22. Modifikuotas Zeitco prietaisas (1 pav.). 5.1.
23. Bunzeno kolba. 5.
24. Įranga kūlių sporų kiekiui nustatyti mikroskopiniu metodu: 5.2.
25. Mikroskopas, didinantis 50 kartų. 5.2.
26. Hemacitometras (specialus mikroskopinis įtaisas, kurio pagrindinę dalį sudaro sudalytas langeliais objektinis stiklelis). 5.2.
27. 500 ml Erlenmejerio kolba. 5.2.
28. Kapiliarinis lašintuvas.
29. Ėminių ėmimas Pagal LST ISO
31. Kūlių sporų kiekio nustatymas svorio analizės metodu 7.
32. Zeitco prietaiso paruošimas tyrimui: 7.1.
33. Į Zeitco prietaiso cilindrinės dalies apatinį trečdalį įstatomas žiedas, pagamintas iš plieninės 1-2 mm diametro vielos. Žiedo dydis atitinka vidinį prietaiso diametrą. Ant žiedo uždedamas 2-4 mm dydžio akučių metalinis sietas, kurio dydis atitinka vidinį prietaiso diametrą. 7.1.
34. Iš sietinio audinio iškerpami du apskritimai, kurių diametras lygus vidiniam Zeitco prietaiso cilindrinės dalies diametrui, ir uždedami ant metalinio sieto. 7.1.
35. Iš bepelenio filtro iškerpamas apskritimas, kurio diametras 0,3 cm didesnis už išorinį Zeitco prietaiso diametrą. Po to iš jo pašalinami riebalai, išlaikant acto rūgšties etilo esteryje 20-30 min., ir išdžiovintas pasveriamas analizinėmis svarstyklėmis ± 0,001 g tikslumu. 7.1.
36. Filtras įdedamas į nuimamą prietaiso dalį ant guminės tarpinės, kurios dydis lygus išoriniam prietaiso diametrui. Guminė tarpinė prieš tai laikoma 2-3 val. acto rūgšties etilo esteryje. Po gumine tarpine įdedamas metalinis sietelis, o cilindrinė ir konusinė prietaiso dalys sujungiamos varžtais. 7.1.
37. Zeitco prietaisas įstatomas į kamštį, kuriuo uždaroma Bunzeno kolba. Bunzeno kolba sujungiama su čiurkšliniu vakuuminiu siurbliu arba vakuuminiu siurbliu. 1 pav. Modifikuotas Zeitco prietaisas Sandara:1) sietinio audinio apskritimai; 2) metalinis sietas; 3) popierinis filtras; 4) plieninės vielos žiedas; 5) guminė tarpinė; 6) sietelis; 7) guminis kamštis; 8) Bunzeno kolba; 9) žarna sujungimui su siurbliu. 7.
38. Tyrimas: 7.2.
39. Laboratorinėmis svarstyklėmis pasveriama 50,0 g grūdų laboratorinio ėminio. Tiriamoji ėminio dala supilama į 250 ml kūgio pavidalo kolbą ir užpilama 100 ml acto rūgšties etilo esteriu. 7.2.
40. Kolba su grūdais ir esteriu purtoma 1 min. ir, išlaikius 10-20 s dirvos ir smėlio dalelėms nusodinti, skystis nupilamas į Zeitco prietaisą. 7.2.
41. Grūdų plovimas acto rūgšties etilo esteriu kartojamas, iki skystis kolboje su grūdais lieka bespalvis. 7.2.
42. Po filtravimo Zeitco prietaisas išardomas, išimamas iš jo filtras ir, išlaikius 5 min. traukos spintoje ore, pasveriamas analizinėmis svarstyklėmis ± 0,001 g tikslumu. PASTABA. Visi darbai su acto rūgšties etilo esteriu atliekami traukos spintoje. 7.
43. Rezultatų apskaičiavimas: 7.3.
44. Kūlių sporų kiekis (X) procentais apskaičiuojamas pagal formulę: X = (m1 – m2) × 2 čia: m1 – filtro masė po filtravimo gramais; m2 – filtro masė prieš filtravimą gramais. Kūlių sporų kiekis apskaičiuojamas 0,01 % tikslumu. 7.3.
45. Leidžiami nuokrypiai tarp pirminio ir kontrolinio tyrimų ± 0,01 %.
46. Kūlių sporų kiekio nustatymas mikroskopiniu metodu 8.
47. Tyrimas: 8.1.
48. Laboratorinėmis svarstyklėmis pasveriama 50,0 g grūdų laboratorinio ėminio. Iš tiriamosios ėminio dalos rankomis išrenkami kūlių maišeliai ar jų dalys ir pasveriami (X1). Po to tiriamoji ėminio dala supilama į 500 ml Erlenmejerio kolbą ir įpilama 100 ml vandens. Kolba užkemšama ir nuolat purtoma 2 min. Jei kūlių sporų kiekis nėra skaičiuojamas iš karto, vandeninė kūlių suspensija supilama į kitą kolbą (nebūtina, jei skaičiavimai atliekami iš karto). 8.1.
49. Hemacitometro paviršius kruopščiai nuvalomas švelniu lininiu audiniu. Dengiamasis stiklelis uždedamas ant grotelių taip, kad jis gulėtų ant abiejų pakilimų. Vandeninė kūlių suspensija supurtoma ir maža jos porcija įpilama į kapiliarinį lašintuvą. Nedidelis suspensijos kiekis greitai ir atsargiai kapiliariniu lašintuvu įlašinamas po dengiamuoju stikleliu. Būtina atkreipti dėmesį, kad po dengiamuoju stikleliu nebūtų vandens pertekliaus. Susidarius burbuliukams, tyrimas kartojamas iš naujo, kad būtų gautas švarus laukas. 8.1.
50. Kai gaunamas tinkamas laukas, hemacitometras dedamas po mikroskopu ir skaičiuojamas iš eilės devyniuose ploteliuose esantis sporų kiekis. Užrašomas bendras suskaičiuotų sporų kiekis. 8.
51. Rezultatų apskaičiavimas Kūlių sporų kiekis (X2), esantis viename ml vandeninės kūlių suspensijos, apskaičiuojamas pagal formulę: X2 = (suskaičiuotos sporos × k) / n čia: k – perskaičiavimo koeficientas, parinktas priklausomai nuo naudoto hemacitometro objektinio stiklelio sudalijimo ir pateiktas hemacitometro naudojimo instrukcijoje; n – plotelių, kuriuose suskaičiuotos kūlių sporos, skaičius (n = 9). Kūlių sporų kiekį (X2) padauginus iš 100, suskaičiuojamas sporų skaičius (X3), esantis 100 ml vandeninės kūlių suspensijos. Šį skaičių padalijus iš (3,75x108), gaunama kūlių sporų masė gramais (X4) analizuojamoje suspensijoje. Apskaičiuotą kūlių sporų masę (X4) pridėjus prie tyrimo pradžioje gramais nustatytos sveikų ir suskilusių kūlių maišelių masės (X1), gaunama 50,0 g grūdų esanti kūlių sporų masė (X). Kūlių sporų masę (X) padauginus iš 5, gramais apskaičiuojama 250 g grūdų esančių kūlių sporų masė. Jei ji viršija 0,13 g (t. y. 0,05 % masinės dalies), grūdai laikomi kūlėtais. Kūlių sporų masė apskaičiuojama 0,001 g tikslumu. Kokybės dokumente įrašomas kūlių sporų kiekis procentais, suapvalintas iki 0,01 %.
52. Tyrimo ataskaita Tyrimo ataskaitoje turi būti pažymėtas taikytas metodas ir pateikti gauti rezultatai. Taip pat turi būti nurodytos visos detalės, kurios skyrėsi nuo aprašytų šioje metodikoje, ir visos aplinkybės, galėjusios turėti įtakos rezultatams. Tyrimo ataskaitoje turi būti pateikta visa informacija, reikalinga išsamiai apibūdinti ėminį. ______________