LIETUVOS RESPUBLIKOS ŽEMĖS ŪKIO MINISTRAS Į S A K Y M A S DĖL BEKAULĖS GALVIJIENOS FIZINĖS PATIKROS 2003 m. rugsėjo 30 d

LIETUVOS RESPUBLIKOS ŽEMĖS ŪKIO MINISTRAS Į S A K Y M A S DĖL BEKAULĖS GALVIJIENOS FIZINĖS PATIKROS 2003 m. rugsėjo 30 d. Nr. 3D-403 Vilnius Vykdydamas teisės derinimo priemonių 2003 metų plano, patvirtinto Lietuvos Respublikos Vyriausybės 2003 m. kovo 5 d. nutarimu Nr. 292 (Žin., 2003, Nr. 25-1019), 3.7.2.9-T32 priemonę:

1. Tvirtinu Mėginių parinkimo vykdant bekaulės galvijienos fizinę patikrą taisykles (pridedama).
2. Nustatau, kad nuo narystės Europos Sąjungoje dienos bus taikomos 2002 m. gegužės 3 d. Komisijos reglamento (EB) Nr. 765/2002 dėl mėginių parinkimo ir tam tikrų išsamių taisyklių, taikomų fiziškai tikrinant bekaulius galvijienos gabalus, už kuriuos skiriamos eksporto kompensacijos, nuostatos. ŽEMĖS ŪKIO MINISTRAS JERONIMAS KRAUJELIS ______________ PATVIRTINTA Lietuvos Respublikos žemės ūkio ministro 2003 m. rugsėjo 30 d. įsakymu Nr. 3D-403 Mėginių parinkimo vykdant bekaulės galvijienos fizinę patikrą TAISYKLĖS Mėginių parinkimo vykdant bekaulės galvijienos fizinę patikrą taisyklės parengtos pagal 2002 m. gegužės 3 d. Komisijos reglamentą (EB) Nr. 765/2002 dėl mėginių parinkimo ir tam tikrų išsamių taisyklių, taikomų fiziškai tikrinant bekaulius galvijienos gabalus, už kuriuos skiriamos eksporto kompensacijos, nustatymo bei atsižvelgiant į 1990 m. vasario 12 d. Tarybos reglamentą (EEB) Nr. 386/90 dėl žemės ūkio produktų, už kuriuos numatytos eksporto kompensacijos arba kitos išmokos, eksporto monitoringo. I. BENDROSIOS NUOSTATOS
3. Mėginių parinkimo vykdant bekaulės galvijienos fizinę patikrą taisyklių (toliau – taisyklės) tikslas – užtikrinti, kad eksporto kompensacijos būtų skiriamos tik už tuos įpakuotus bekaulės galvijienos gabalus, kurie yra gauti iš suaugusių vyriškos lyties galvijų mėsos ir juose yra minimalus liesos mėsos kiekis.
4. Taisyklės taikomos fiziškai tikrinant eksportuojamą bekaulę galvijieną, kuri žemės ūkio produktų nomenklatūroje eksporto kompensacijoms gauti pažymėta kodais 0201 30 00 9100, 0201 30 00 9120, 0201 30 00 9060, 0202 30 90
5. Kompetentinga institucija – įstaiga, Lietuvos Respublikos Vyriausybės įgaliota atlikti žemės ūkio produktų, už kuriuos mokamos eksporto kompensacijos, fizinį patikrinimą bei tų produktų pavyzdžių (mėginių), paimtų muitinio tikrinimo metu, laboratorinius tyrimus. Galvijiena – mėsa, gauta iš suaugusių vyriškos lyties galvijų, žemės ūkio produktų nomenklatūroje eksporto kompensacijoms gauti pažymėta kodais 0201 30 00 9100, 0201 30 00 9120, 0201 30 00 9060, 0202 30 90
6. II. EKSPORTUOJAMOS BEKAULĖS GALVIJIENOS TIKRINIMAS
7. Kompetentinga institucija tikrina: 3.
8. ar bekaulės galvijienos gabalai, kurių kodai 0201 30 00 9100, 0201 30 00 9120, yra atskirai įpakuoti; 3.
9. bekaulės galvijienos gabalų, kurių kodai 0201 30 00 9100, 0201 30 00 9120, kilmę; 3.
10. minimalų vidutinį liesos mėsos bekauliuose galvijienos gabaluose, kurių kodai 0201 30 00 9100, 0201 30 00 9120, 0201 30 00 9060, 0202 30 90 9200, kiekį.
11. Fizinio patikrinimo metu mėginį turi sudaryti dvi pilnos dėžės, paimtos iš dviejų skirtingų siuntos vietų.
12. Tikrinant, ar vykdomas šių taisyklių 3.1 punkto reikalavimas: 5.
13. Kompetentinga institucija patikrina, ar kiekvienas šių taisyklių 4 punkte nurodyto mėginio pirmoje dėžėje esantis galvijienos gabalas yra įpakuotas atskirai ir ar pakuotėje nėra daugiau kaip vieno gabalo. Tokiu būdu patikrinama ir antroji dėžė. 5.
14. Radus, kad abiejose dėžėse kartu paėmus atskirai neįpakuotas buvo ne daugiau kaip vienas gabalas arba vienoje pakuotėje buvo daugiau kaip vienas gabalas, tačiau visi kiti šių taisyklių reikalavimai eksporto kompensacijai gauti tenkinami, siunta laikoma tvarkinga. Jeigu nurodytieji reikalavimai netenkinami, fiksuojamas šių taisyklių pažeidimas. 5.
15. Nustačius šį taisyklių pažeidimą, už siuntą mokėtina eksporto kompensacija apskaičiuojama remiantis patikslintu svoriu. Patikslintas svoris apskaičiuojamas deklaruotąjį grynąjį svorį sumažinus tokiu santykiu, kokį sudaro reikalavimų eksporto kompensacijoms gauti netenkinančių gabalų svoris ir visas grynasis mėginio svoris.
16. Tikrinant, ar vykdomas šių taisyklių 3.2 punkto kilmės reikalavimas: 6.
17. Kompetentinga institucija ima tyrimui mėginį, kurį turi sudaryti vienas ar du gabalai, atsitiktinai paimti iš 4 punkte nurodytos pirmosios mėginio dėžės. Jeigu tyrimo metu nustatoma, kad tai ne suaugusio vyriškos lyties galvijo mėsa, eksporto kompensacija nemokama. 6.
18. Patikrinimai atliekami pagal metodiką (priedas). 6.
19. Įtariant šių taisyklių 3.2 punkto pažeidimą, tokie patikrinimai atliekami pasirinktinai viso eksporto metu, tikrinant ne mažiau kaip trečdalį to eksportuotojo fiziniam tikrinimui atrinktų siuntų.
20. Tikrinant, ar vykdomas šių taisyklių 3.3 punkto reikalavimas, visas 4 punkte nurodytos pirmosios mėginio dėžės turinys sumalamas į vientisą masę. Jeigu mėginyje esančios liesos mėsos kiekis yra mažesnis už nustatytą minimumą, tokiu būdu patikrinamas ir antrosios dėžės turinys. Jeigu vidutinis abiejose dėžėse esančios liesos mėsos kiekis mažesnis už nustatytą vidutinį liesos mėsos minimalų dydį, eksporto kompensacija nemokama. ______________ Mėginių parinkimo vykdant bekaulės galvijienos fizinę patikrą taisyklių priedas BEKAULĖS MĖSOS GABALŲ, GAUTŲ IŠ SUAUGUSIŲ GALVIJŲ, KILMĖS TYRIMAI Galvijo lyties nustatymo metodika paremta polimerazės grandinine reakcija (PGR) ir susideda iš mėginių ėmimo, DNR ekstrakcijos, PGR ir elektroforezės gelyje.
21. Mėginių ir antrinių mėginių ėmimas Antrinis mėginys steriliu peiliu1 (skalpeliu ar pan.) išpjaunamas iš pateikto mėsos gabalo vidinės dalies. Po to šis mėginys sumalamas mėsmale ar supjaustomas į mažesnius gabalėlius, užtikrinant pakankamai veiksmingą ekstrakciją. Mėginiai turi būti ruošiami ne toje pačioje darbo vietoje, kur buvo atliekama PGR. Medžiagą apdoroti reikia lengvai valomoje aplinkoje, pageidautina – ant švaraus darbo stalo, užtikrinant, kad vienas mėginys nebūtų užteršiamas kito mėginio medžiagomis. Ruošiant mėsos mėginį reikia naudoti sterilias1 geležtes, skalpelius ar panašius įrankius.
22. DNR ekstrakcija ir valymas DNR ekstrakcija ir valymas atliekami arba naudojant standartines procedūras2, t. y. parengtus naudoti priemonių komplektus (remiantis tokiu tyrimo principu: mėsos mėginys ištirpinamas lizės buferiniame tirpale, kuriame yra paviršinio aktyvumo medžiagų, detergentų ir proteinazės K, tada ištirpinto mėginio užtepama ant DNR surišančių dervų, junginiai be DNR pašalinami keliais plovimo seansais, galiausiai išgryninta DNR išplaunama į vandenį arba silpną buferinį druskos tirpalą), arba ekstrahuojant DNR natrio hidroksido tirpale
23. Rekomenduojama, tačiau neprivaloma, elektroforeze gelyje patikrinti, ar ekstrakcija buvo sėkminga. Patvirtinimas: atliekant ekstrakciją iš kiekvienos mėginių partijos, turi būti atlikta viena kontrolinė ekstrakcija (t. y. be mėsos), norint patvirtinti taikomos procedūros užbaigtumą.
24. Polimerazės grandininė reakcija (PGR) PGR pagrindą sudaro trijų etapų procedūra – denatūracija, grunto atkaitinimas, ekstensija, kurią reikia pakartotinai atlikti nuo 25 iki 40 kartų (metodo „ciklų“ skaičius). Reagentai (reakcijos buferinis tirpalas, MgCl2, deoksinukleotidai, gruntai, karštyje stabili DNR polimerazė, sterilus vanduo) sumaišomi kartu pagal nustatytą metodiką, taip suformuojant pagrindinio mišinio bazę. Ruošiant pagrindinį mišinį naudojamos tam tikslui skirtos pipetės. Po to šio pagrindinio mišinio įlašinama į DNR šabloną (ekstrahuotą DNR). Reakcija vykdoma termociklintuve. Jai pasibaigus PGR produktai tiriami elektroforeze gelyje arba laikomi 4°C arba – 20°C temperatūroje. Dirbant su šablonu rekomenduojamas taikyti metodas4 turi sustiprinti seką arba amelogenino lokuse (homologinis genas), arba ZFX/Y srityje (specifinė alelių PGR). Būdingi gruntai, naudojami taikant šių dviejų tipų metodus, yra: Tiesioginis amelogeninas: 5“-CAGCCAAACCTCCCTCTGC-3“ Atvirkštinis amelogeninas: 5“-CCCGCTTGGTCTTGTCTGTTGC-3“ (Ennis S. ir Gallagher T. F.