NORMĂ SANITARĂ VETERINARĂ din 21 iunie 2006

(3)din Norma sanitară-veterinară privind condiţiile de sănătate animală care reglementează comerţul României cu statele membre ale Uniunii Europene şi importul din ţări terţe de carne proaspătă de pasăre, aprobată prin Ordinul ministrului agriculturii, alimentaţiei şi pădurilor nr. 391/2002 Publicat în MONITORUL OFICIAL nr. 556 din 27 iunie 2006 Articolul 1 Pentru aplicarea prevederilor art. 5 alin.

(3)din Norma sanitară-veterinară privind condiţiile de sănătate animală care reglementează comerţul României cu statele membre ale Uniunii Europene şi importul din ţări terţe de carne proaspătă de pasăre, aprobată prin Ordinul ministrului agriculturii, alimentaţiei şi pădurilor nr. 391/2002, publicat în Monitorul Oficial al României, Partea I, nr. 739 din 9 octombrie 2002, prelevarea de probe şi testarea virusologică pentru detectarea virusului bolii de Newcastle trebuie să se efectueze în conformitate cu prevederile din anexă. Articolul 2 Anexa face parte integrantă din prezenta normă sanitară veterinară. Anexa ────── la norma sanitară veterinară ──────────────────────────── TEHNICA DE PRELEVARE ŞI TESTARE VIRUSOLOGICĂ PENTRU DETECTAREA VIRUSULUI BOLII DE NEWCASTLE

1. Prelevarea de probe 1.
2. Se prelevează cel puţin 60 de probe, cuprinzând minimum 30 de tampoane cloacale şi 30 de tampoane traheale, de la fiecare efectiv de păsări. 1.
3. Trebuie să fie prelevate probe de la cel puţin 60 de păsări. 1.
4. Probele sunt prelevate cu 5 zile înainte de tăiere şi se transportă pentru testare la Laboratorul Naţional de Referinţă pentru Boala de Newcastle, răcite, dar nu îngheţate.
5. Manipularea probelor 2.
6. Sunt grupate cel mult 5 probe de acelaşi tip. 2.
7. Tampoanele trebuie să fie aşezate într-o cantitate suficientă de mediu cu antibiotic, pentru a se asigura imersiunea completă, iar după agitare trebuie să fie lăsate pentru aproximativ două ore la temperatura ambiantă sau perioade mai lungi la temperatura de 4°C şi apoi clarificate prin centrifugare, de exemplu, 800-1.000 x g timp de 10 minute.
8. Mediul cu antibiotic 3.
9. Un exemplu tipic de tampon cloacal este: 10.000 de unităţi/ml penicilină, 10 mg/ml streptomicină, 0,25 mg/ml gentamicină şi 5.000 de unităţi/ml micostatin în soluţie tamponată de fosfat salin la un pH de 7,2-7,
10. 3.
11. Sunt adăugate 50 mg/ml de oxitetraciclină. 3.
12. Concentraţia de antibiotic poate să fie redusă la diluţii în bază 5 pentru tampoanele traheale. 3.
13. Este foarte important ca, atunci când se prepară mediul, pH-ul să fie verificat şi reajustat după adăugarea de antibiotice.
14. Izolarea virusului pe ouă embrionate de pasăre 4.
15. Fluidul supernatant clarificat se va inocula în cantităţi de câte 0,2 ml în cavitatea alantoidiană, fiecare fluid într-un număr minim de 4 ouă embrionate de pasăre ce au fost incubate timp de 8-11 zile. 4.
16. Ideal este ca aceste ouă să fie obţinute dintr-un lot de păsări liber de agenţi patogeni, iar atunci când aceasta nu se poate practica, se acceptă folosirea ouălor obţinute dintr-un lot ce se prezintă a fi liber de anticorpi produşi de prezenţa virusului bolii de Newcastle. 4.
17. Ouăle inoculate sunt menţinute la temperatura de 37°C şi sunt supuse zilnic mirajului. 4.
18. Ouăle cu embrioni morţi sau pe cale de a muri şi toate ouăle rămase 4 zile după inoculare trebuie să fie răcite la temperatura de 4°C, iar lichidele alantoamniotice să fie testate pentru activitatea de hemaglutinare.
19. Interpretare 5.
20. Testul este evaluat negativ dacă nu este detectat niciun fel de activitate hemaglutinantă şi nu este izolat niciun virus. 5.
21. Când se izolează virusul bolii de Newcastle, lotul de păsări este evaluat ca un lot suspect de boală şi este supus prevederilor Normei sanitare veterinare privind măsurile de profilaxie, supraveghere şi combatere a bolii de Newcastle, aprobată prin Ordinul ministrului agriculturii, alimentaţiei şi pădurilor nr. 312/2001, publicat în Monitorul Oficial al României, Partea I, nr. 628 din 5 octombrie
22. 5.
23. Dacă virusul izolat se dovedeşte a fi de origine vaccinală, prelevările de probe şi testările trebuie să se repete. ___________